Vörur

X-gal (einnig skammstafað BCIG fyrir 5-bróm-4-klór-3-indólýl-β-D-galaktópýranósíð) er lífrænt efnasamband sem samanstendur af galaktósa sem tengist útskiptu indóli.Efnasambandið var búið til af Jerome Horwitz og samstarfsaðilum árið 1964. Formlega efnaheitið er oft stytt í minna nákvæmar en einnig minna fyrirferðarmiklar setningar eins og brómóklórindoxýlgalaktósíð.X frá indoxýl getur verið uppspretta X í X-gal samdrættinum.X-gal er oft notað í sameindalíffræði til að prófa tilvist ensíms, β-galaktósíðasa, í stað venjulegs marks þess, β-galaktósíðs.Það er einnig notað til að greina virkni þessa ensíms í vefjafræði og bakteríufræði.X-gal er einn af mörgum indoxýl glýkósíðum og esterum sem gefa óleysanleg blá efnasambönd sem líkjast indigo litarefni vegna ensímhvataðrar vatnsrofs.

X-gal er hliðstæða laktósa og getur því verið vatnsrofið af β-galaktósíðasa ensíminu sem klýfur β-glýkósíðtengi í D-laktósa.X-gal, þegar það er klofið með β-galaktósíðasa, gefur galaktósa og 5-bróm-4-klór-3-hýdroxýindól - 1. Hið síðarnefnda dimerísar síðan sjálfkrafa og er oxað í 5,5'-díbróm-4,4'-díklór -indigo - 2, ákaflega blá vara sem er óleysanleg.X-gal sjálft er litlaus, þannig að tilvist blálitaðrar vöru getur því verið notað sem prófun á tilvist virks β-galaktósíðasa.Þetta gerir einnig kleift að nota bakteríu β-galaktósíðasa (svo kallaður lacZ ) sem fréttaritari í ýmsum forritum.

Í tvíblendingagreiningu má nota β-galaktósíðasa sem skýrslugjafa til að bera kennsl á prótein sem hafa samskipti sín á milli.Í þessari aðferð er hægt að skima erfðamengissöfn með tilliti til próteinasamskipta með því að nota ger eða bakteríukerfi.Þar sem farsæl víxlverkun er á milli próteina sem verið er að skima, mun það leiða til þess að virkjunarsvæði bindist við hvata.Ef hvatinn er tengdur við lacZ geni mun framleiðsla á β-galaktósíðasa, sem leiðir til myndunar blálitaðra nýlendna í nærveru X-gal, því gefa til kynna farsæla víxlverkun milli próteina.Þessi tækni kann að vera takmörkuð við skimunarsöfn sem eru minni en í kringum 106. Vel heppnuð klofning X-gal skapar einnig áberandi vonda lykt vegna rokkunar indóls.

Þar sem X-gal sjálft er litlaus, má nota tilvist blálitrar vöru sem prófun á tilvist virks β-galaktósíðasa.

Þessi auðvelda auðkenning á virku ensími gerir genið fyrir βgalaktósíðasa (lacZ genið) kleift að nota sem skýrslugen í ýmsum forritum.