Vörur

LecA (PA-IL) er frumudrepandi lektín og adhesín framleitt af Pseudomonas aeruginosa sem bindur vatnsfælin galaktósíð með mikilli sérhæfni og sækni.Með því að nota lecA-egfp þýðingarsamruna og ónæmisblottagreiningu á líffilmu utanfrumu fylkinu, sýnum við að lecA er tjáð í líffilmuræktuðum frumum.Í kyrrstöðu líffilmumælingum á bæði pólýstýreni og ryðfríu stáli minnkaði dýpt líffilmu og yfirborðsþekju vegna stökkbreytingar á lecA og aukið í LecA-offramleiðandi stofninum PAO-P47.Líffilmuyfirborðsþekju móðurstofnsins, PAO-P47 en ekki lecA stökkbreytileikans á stálmiða, var einnig hindrað með vexti í nærveru annað hvort ísóprópýl-beta-D-þíógalaktósíðs (IPTG) eða p-nítrófenýl-alfa-D-galaktósíðs ( NPG).Ennfremur var hægt að dreifa þroskuðum villigerða líffilmum sem myndast í fjarveru þessara vatnsfælnu galaktósíða með því að bæta við IPTG.Aftur á móti hafði viðbót p-nítrófenýl-alfa-L-fúkósa (NPF) sem hefur mikla sækni í P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n engin áhrif á myndun líffilmu eða dreifingu.Svifvöxtur P. aeruginosa PAO1 hafði ekki áhrif á nærveru IPTG, NPG eða NPF, né var stofninn fær um að nýta þessar sykrur sem kolefnisgjafa, sem bendir til þess að áhrifin sem sáust á myndun líffilmu væru vegna samkeppnishömlunar á LecA-bindli. bindandi.Svipaðar niðurstöður fengust einnig fyrir líffilmur sem ræktaðar voru við kraftmikil flæðisskilyrði á stálmiða, sem bendir til þess að LecA stuðli að P. aeruginosa líffilmuarkitektúr við mismunandi umhverfisaðstæður.

Alfa-L-fúkósíðasi (EC 3.2.1.51) sem getur losað t-fúkósýl leifina úr hliðarkeðju xyloglucan fásykra hefur greinst í laufum Arabidopsis plantna.Ennfremur var alfa-L-fúkósíðasi með svipaða hvarfefnissérhæfni hreinsaður úr kálblöðum (Brassica oleracea) til að mynda eitt band á SDS-PAGE.Tvær peptíðraðir voru fengnar úr þessu próteinbandi og þær voru notaðar til að bera kennsl á Arabidopsis gen sem kóðar fyrir alfa-fúkósíðasa sem við leggjum til að kalla AtFXG1.Að auki hefur einnig fundist Arabidopsis gen með samlíkingu við þekkta alfa-L-fúkósíðasa og við lögðum til að það yrði nefnt AtFUC1.Bæði AtFXG1 og ATFUC1 voru tjáð misleitt í Pichia pastoris frumum og alfa-L-fúkósíðasavirknin seytt út í ræktunarmiðilinn.Alfa-L-fúkósíðasinn sem er kóðaður af AtFXG1 var virkur gegn fásykrunum úr xyloglucan XXFG sem og gegn 2'-fúkósýl-laktitóli en ekki gegn p-nítrófenýl-alfa-L-fúkópýranósíði.Hins vegar var AtFUC1 misleitt tjáð aðeins virkt gegn 2'-fúkósýl-laktitóli.Þannig verður hið fyrrnefnda að tengjast xyloglucan umbrotum.