Vörur

Einn af þeim þáttum sem koma í veg fyrir klíníska beitingu endurnýjunarlyfja á hrörnunarbrjósksjúkdóma er hentug uppspretta frumna.Chondrocytes, eina frumugerð brjósks, ræktuð in vitro við ræktunaraðstæður til að stækka frumufjölda, missa svipgerð sína ásamt getu til að mynda hýalískan brjóskvef.Í þessari rannsókn komumst við að því að sermis- og vaxtarþáttafrítt þrívíddar (3D) ræktunarkerfi endurheimtir getu yfirgangsfrumna til að mynda brjóskvef in vitro, ferli sem felur í sér sox9. Articular chondrocytes frá nautgripum voru fluttar tvisvar til leyfa stækkun frumufjölda (P2) og ræktað í miklum þéttleika á 3D kollagen-gerð II húðuðum himnum í miðlum með háu glúkósainnihaldi ásamt insúlíni og dexametasóni (SF3D).Frumurnar voru einkenndar eftir einlaga stækkun og eftir þrívíddarræktun með frumuflæðismælingu, genatjáningu og vefjafræði.Snemma breytingar á boðleiðum við endurgreiningu voru einkenndar. P2 frumurnar sýndu 99% CD44(+) og 40% CD105(+) og 40% CD105(+) genatjáningarsnið sem bendir til millisvæða frumna.P2 í SF3D tjáði chondrogenic gen og uppsafnað utanfrumufylki.Að lækka insúlínviðtaka (IR) með HNMPA-(AM3) eða PI-3/AKT kínasaferli (virkjað með insúlínmeðferð) með Wortmannin hamlaði kollagenmyndun.HNMPA-(AM3) dró úr tjáningu á Col2, Col11 og IR genum sem og Sox6 og -9.Sam-ónæmisútfelling og litning ónæmisúrfellingargreiningar á HNMPA-(AM3)-meðhöndluðum frumum sýndu bindingu samvirkjanna Sox6 og Med12 við Sox9 en minnkaði Sox9-Col2a1 bindingu. Við lýsum nýrri ræktunaraðferð sem gerir kleift að fjölga chondrocyte og stuðlar að hýalínlík brjóskvefsmyndun að hluta til fyrir insúlínmiðlaða Sox9-Col2a1 bindingu.Kanna þarf hæfi vefsins sem myndast með þessari nálgun til notkunar í liðviðgerðum in vivo.