Vörur

Heilkjörnungafrumur innihalda viðkvæmt jafnvægi af litlu magni af fjórum deoxýríbónúkleósíð þrífosfötum (dNTP), sem nægir aðeins fyrir nokkrar mínútur af DNA eftirmyndun.Bæði skortur og ofgnótt af einu dNTP getur leitt til aukinnar stökkbreytingartíðni, gallaðrar DNA-viðgerðar eða skerðingar á DNA hvatbera.dNTP eru venjulega magngreind með ensímprófi þar sem innlimun geislavirks dATP (eða geislavirks dTTP í prófun fyrir dATP) í sértæk tilbúin fákirni með DNA pólýmerasa er í réttu hlutfalli við styrk óþekkta dNTP.Við komumst að því að almennt notaði Klenow DNA pólýmerasi getur komið í stað samsvarandi ríbónúkleótíðs fyrir óþekkta dNTP sem leiðir í sumum tilfellum til mikils ofmats á dNTP.Við lýsum nú greiningarskilyrðum fyrir hvert dNTP sem forðast innlimun ríbónúkleótíðs.Fyrir dTTP og dATP mælingarnar nægir að lágmarka styrk Klenow ensímsins og merkts dATP (eða dTTP);fyrir dCTP og dGTP þurftum við að skipta út Klenow ensíminu fyrir annað hvort Taq DNA pólýmerasa eða Thermo Sequenase.Við leggjum til að í sumum fyrri skýrslum gæti innlimun ríbónúkleótíðs valdið of háum gildum fyrir dGTP og dCTP.