Vörur

Oxunarskemmdir á DNA basum leiða venjulega til myndunar oxaðra púrína, einkum 7,8-díhýdró-8-oxógúaníns (8-oxoG) og 7,8-díhýdró-8-oxóadeníns (8-oxóA), þar sem hið fyrra er vel þekkt stökkbreytandi meinsemd.Þar sem 8-oxoG er auðveldlega háð frekari oxun samanborið við venjulega basa, var innsetning basa við DNA nýmyndun á móti oxuðu formi 8-oxoG rannsökuð in vitro.Tilbúið sniðmát sem innihélt eina 8-oxoG meinsemd var fyrst meðhöndlað með mismunandi eins rafeinda oxunarefnum eða við stöku súrefnisaðstæður og síðan sett í primer framlengingu hvatað af Klenow fragment exo- (Kf exo-), kálfs thymus DNA pólýmerasa alfa (pol alfa) ) eða manna DNA pólýmerasa beta (pol beta).Í samræmi við fyrri skýrslur eru dAMP og dCMP sett inn valkvætt á móti 8-oxoG með öllum þremur DNA pólýmerösunum.Athyglisvert var að oxun á 8-oxoG kom í ljós að framkalla dAMP og dGMP innsetningu á móti meinsemdinni af Kf exo- með tímabundinni hömlun á primer framlengingu sem kemur fram á stað hins breytta basa.Ennfremur myndar meinið blokk við DNA-myndun með pol alfa og pol beta.Tilraunir með 8-oxoA-breytt sniðmát fákjörni sýna að bæði 8-oxoA og oxað form 8-oxoA bein innsetning dTMP með Kf exo-.Massagreining á fákirni sem innihalda 8-oxoG fyrir og eftir oxun með IrCl62-samræmast oxun á fyrst og fremst 8-oxoG staðnum, sem leiðir til myndunar gúanidínóhýdantóínhluta sem aðalafurð.Engar vísbendingar um myndun abasic staða fengust.Þessar niðurstöður sýna að oxað form af 8-oxoG, hugsanlega guanidinohydantoin, getur stýrt ranglestri og rangri innsetningu dNTPs meðan á DNA nýmyndun stendur.Ef slíkt ferli ætti sér stað in vivo myndi það tákna punktstökkbreytandi meinsemd sem leiðir til G-->T og G-->C umbreytinga.Hins vegar sýnir samsvarandi oxað form 8-oxoA fyrst og fremst rétta innsetningu T við DNA nýmyndun með Kf exo-.