Vörur

Próteinfosfórun stjórnar fjölbreyttri frumustarfsemi og gegnir lykilhlutverki í frumþroska plantna.Til að bæta við og útvíkka fyrri rannsóknir á próteinfosfórun í Arabidopsis ungplöntum notuðum við aðra nálgun sem sameinar próteinútdrátt við aðstæður án eðlisbreytinga og óhreyfð málmjónasækni litskiljun (IMAC) auðgun ósnortinna fosfópróteina í Rubisco-tæmdu útdrætti, fylgt eftir með auðkenningu með því að nota tvívíða gel rafdrætti (2-DE) og vökvaskiljun-tandem massagreiningu (LC-MS/MS).Inn-gel trypsín melting og greining á völdum hlaupblettum auðkenndu 144 fosfórýleruð peptíð og leifar, þar af fundust aðeins 18 fosfópeptíð og 8 fosfósíð í PhosPhAt 4.0 og P3DB Arabidopsis thaliana fosfórunarstað gagnagrunna.Meira en helmingur af 82 auðkenndum fosfópróteinum tók þátt í kolvetnaumbrotum, ljóstillífun/öndun eða oxunarálagssvörun sms.Auðgun ósnortinna fosfópróteina fyrir 2-DE og LC-MS/MS virðist auka greiningu á fosfórýleruðum þreónín- og týrósínleifum samanborið við aðferðir sem nýta sér peptíðstigs auðgun, sem bendir til þess að þessar tvær aðferðir séu nokkuð samfyllingar hvað varðar fosfórýleringarstað.Með því að bera saman niðurstöður fyrir unga ungplöntur og þær sem áður voru fengnar fyrir þroskuð Arabidopsis-lauf greindust fimm prótein sem eru mismunandi fosfórýleruð í þessum vefjum, sem sýnir möguleika þessarar tækni til að rannsaka gangverki próteinfosfórunar við plöntuþroska.