Vörur

Líkt og aðrar jákvæðar strengja RNA veirur eru tombusveirur endurteknar með himnubundinni veiruafritunarfléttunni (VRC).VRC samanstendur af p92 veiru-kóðaða RNA-háða RNA-pólýmerasa (RdRp), veiru p33 RNA chaperone og nokkrum samsettum hýsilpróteinum.Til þess að verða starfhæft RdRp eftir þýðingu þess ætti að fella p92 afritunarpróteinið inn í VRC, fylgt eftir með virkjun þess.Við höfum áður sýnt í greiningu sem byggir á frumulausu gerþykkni að virkjun Tomato bushy stunt veirunnar (TBSV) RdRp krefst leysanlegs hýsilþáttar.Í þessari grein auðkennum við frumuhitasjokkpróteinið 70 (Hsp70) sem samnefnda hýsilþáttinn sem þarf til að virkja N-endalega stytt raðbrigða TBSV RdRp.Að auki hamlar blokkun á Hsp70 virkni sem byggir á litlum sameindum RNA nýmyndun af tombusveiru RdRp in vitro.Ennfremur sýnum við að hlutlaus fosfólípíð, nefnilega fosfatidýletanólamín (PE) og fosfatidýlkólín (PC), auka RdRp virkjun in vitro.Aftur á móti sýnir fosfatidýlglýseról (PG) sterk og ríkjandi hamlandi áhrif á RdRp virkjun in vitro.Við sýnum einnig fram á að PE og PC örva RdRp-veiru plús-strengja RNA [(+)RNA] víxlverkun, á meðan PG hamlar bindingu veiru RNA við RdRp.Byggt á örvandi á móti hamlandi hlutverkum ýmissa fosfólípíða í RdRp virkjun tombusveiru, leggjum við til að fitusamsetning markhópa undirfrumuhimna gæti nýst af tombusveirum til að stjórna nýjum VRC samsetningu meðan á sýkingu stendur. (RdRp), sem er ábyrgt fyrir myndun veiru-RNA afkvæma í sýktum frumum nokkurra jákvæða strengja RNA veira, er upphaflega óvirkt.Þessi aðferð er líkleg til að koma í veg fyrir myndun veiru RNA í frumu sem myndi fljótt leiða til örvunar á RNA-kveikju frumu veirueyðandi svörun.Meðan á samsetningu himnubundinna eftirmyndarsamstæðunnar stendur, verður veiru RdRp virkjað með ófullkomnu ferli sem gerir RdRp fær um RNA nýmyndun.Með því að nota TBSV RdRp, sýnum við að samnefnd frumu Hsp70 chaperone og hlutlaus fosfólípíð auðvelda RdRp virkjun in vitro.Aftur á móti hefur fosfatidýlglýseról (PG) ríkjandi hamlandi áhrif á in vitro RdRp virkjun og RdRp-veiru RNA samskipti, sem bendir til þess að himnu örlénið sem umlykur RdRp hafi mikil áhrif á getu þess til RNA myndun.Þannig er virkjun veiru RdRp líklega háð mörgum hýsilþáttum í sýktum frumum.