Vörur

ORF45 prótein Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) er gammaherpesveiru-sérhæft strax-snemma tegument prótein.Fyrri rannsóknir okkar hafa leitt í ljós mikilvæg hlutverk þess bæði á fyrstu og seinustu stigum KSHV sýkingar.Í þessari rannsókn könnuðum við víxlverkun ORF45 með því að nota hóp einstofna mótefna.Til viðbótar við áður þekkta utanfrumustjórnunar kínasa (ERK) og p90 ríbósómal S6 kínasa (RSK) prótein fundum við nokkur önnur samhreinsuð prótein, þar á meðal áberandi prótein sem voru ~38 kDa og ~130 kDa.Massagreining leiddi í ljós að 38 kDa próteinið er veiru ORF33 og 130 kDa próteinið er frumu USP7 (ubiquitin-sérhæfður próteasi 7).Við kortlögðum ORF33-bindandi lénið við mjög varðveittu karboxýl-enda 19 amínósýrurnar (aa) af ORF45 og USP7-bindandi lénið við tilkynnt samstöðu mótíf á miðsvæði ORF45.Með því að nota ónæmisflúrljómunarlitun sáum við sambyggð ORF45 með ORF33 eða USP7 bæði við transsýktar aðstæður og í KSHV-sýktum frumum.Þar að auki tókum við eftir ORF45-háðri flutningi á hluta af ORF33/USP7 frá kjarnanum í umfrymið.Við komumst að því að ORF45 olli aukningu á ORF33 próteinsöfnun sem var afnumin ef annað hvort ORF33- eða USP7 bindandi léninu í ORF45 var eytt.Ennfremur, eyðing á varðveittum karboxýlenda ORF45 í KSHV erfðamenginu dró verulega úr magni ORF33 próteins í KSHV sýktum frumum og afnam framleiðslu á afkvæmaveirum.Samanlagt sýna niðurstöður okkar ekki aðeins nýja þætti ORF45 víxlverkunar, heldur sýna þær einnig fram á að víxlverkanir þessara próteina eru mikilvægar fyrir KSHV ljósafritun. Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) er orsakavaldur nokkurra krabbameina í mönnum.KSHV ORF45 er fjölvirkt prótein sem er nauðsynlegt fyrir KSHV lytic eftirmyndun, en nákvæmlega hvernig ORF45 framkvæmir mikilvægar aðgerðir sínar eru óljósar.Fyrri rannsóknir okkar leiddu í ljós að allt ORF45 prótein í frumum er til í fléttum með mikla mólþunga.Við leituðumst þess vegna að einkenna víxlverkun ORF45 til að veita innsýn í hlutverk þess við ljósafritun.Með því að nota spjaldið af einstofna mótefnum könnuðum við ORF45 víxlverkun í KSHV-sýktum frumum.Við greindum tvo nýja bindifélaga ORF45: veirupróteinið ORF33 og frumu ubiquitin-sérhæfð próteasa 7 (USP7).Við sýnum ennfremur fram á að samspilið milli ORF45 og ORF33 skiptir sköpum fyrir skilvirka framleiðslu KSHV veiruagna, sem bendir til þess að markviss truflun á þessari víxlverkun gæti táknað nýja aðferð til að hindra KSHV ljósafritun.