Vörur

Himnugrunnfræði colicin E1 rásarsvæðisins var rannsökuð með fluorescence resonance energy transfer (FRET).FRET fól í sér erfðafræðilega kóðaða flúrljómandi amínósýru (kúmarín) sem gjafa og sértæka merkta cysteinleif sem var bundin með DABMI (4-(dímetýlamínó)fenýlazófenýl-4'-maleimíði) sem FRET viðtakanda.Flúrljómandi kúmarín leifin var felld inn í próteinið með hornréttu tRNA/amínóasýl-tRNA syntetasapöri sem leyfði sértækri innlimun í hvaða stað sem er innan kólicínrásarsvæðisins.Hvert afbrigði hafði stöðvun (TAG) stökkbreytingu fyrir kúmarín innlimun og cysteine ​​(TGT) stökkbreytingu fyrir DABMI viðhengi.Sex millihelical fjarlægðir innan helices 1-6 voru ákvarðaðar með því að nota FRET greiningu fyrir bæði leysanlegt og himnubundið ástand.FRET gögnin sýndu miklar breytingar á milli helical fjarlægðum milli helices 3-6 við himnusamband sem gaf nýja innsýn í himnubundna uppbyggingu rásarsvæðisins.Almennt minnkaði virkni kúmarín-DABMI FRET milli þyrla við himnubindingu og byggir á regnhlífarlíkani fyrir colicin rásina.Bráðabirgðalíkan fyrir lokað ástand rásarlénsins var þróað byggt á núverandi og áður birtum FRET gögnum.Líkanið gefur til kynna hringlaga uppröðun þyrlna 1-7 réttsælis frá utanfrumuhlið og himnuviðmótstengingu þyrlna 1, 6, 7 og 10 í kringum miðhimnuhárnálina sem myndast af þyrlum 8 og 9.