Vörur

Hvernig áhrif samtímis stökkbreytinga sameinast til að breyta ensímvirkni er ekki auðvelt að sjá fyrir vegna þess að þessi áhrif eru ekki alltaf aukefni á línulegan hátt.Þess vegna getur lýsing á áhrifum samtímis stökkbreytinga á amínósýruleifum sem binda hvarfefnið stuðlað verulega að skilningi á sérhæfni hvarfefnis ensíma.Í beta-glýkósíðasa frá Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) hafa bæði leifar Q39 og E451 víxlverkun við hvarfefnið og þetta er nauðsynlegt til að skilgreina sérhæfingu hvarfefnis.Tvöföld stökkbrigði af Sfbetagly (A451E39, S451E39 og S451N39) voru útbúin með staðstýrðri stökkbreytingu, tjáð í bakteríum og hreinsuð með sækniskiljun.Þessi ensím voru einkennd með því að nota p-nítrófenýl beta-galaktósíð og p-nítrófenýl beta-fúkósíð sem hvarfefni.K cat/Km hlutfallið fyrir staka og tvöfalda stökkbrigði af Sfbetagly sem innihalda staðstýrðar stökkbreytingar í stöðunum Q39 og E451 var notað til að sýna fram á að áhrif tvöföldu stökkbreytinganna (Gdouble) á fría orku ESdouble dagger (ensím-umbreytingarástands flókin) daggerxy) er ekki summan af áhrifunum sem stafa af stökkbreytingunum (Gdouble daggerx og Gdouble daggery).Þessi munur á Gdouble dagger gefur til kynna að áhrif stökkbreytinganna skarast að hluta.Þess vegna telja þessi algengu áhrif aðeins einu sinni í Gdouble daggerxy.Kristöllunargögn um beta-glýkósíðasa sýna tilvist tvíþætt vetnistengis sem inniheldur leifar Q39 og E451 og sama hýdroxýlhóp hvarfefnisins.Þess vegna benda bæði varmafræðileg og kristalfræðileg gögn til þess að leifar Q39 og E451 hafi gagnkvæm áhrif á samspil þeirra við undirlagið.